产品概述
Jurnyarn®Tran-S 是一款专用于悬浮细胞转染的DNA转染试剂,可用于质粒DNA在悬浮生长细胞中的传送。它适用于大规模蛋白生产,及工业化生产中的真核细胞转染。具有不受血清影响、毒性低、稳定性好、转染简单易行、重复性好等优点。
应用范围
Jurnyarn®Tran-S 转染试剂特别适用于293F和CHO-S等悬浮细胞的转染。在有血清和无血清的条件下,均可得到较高的转染效率,且重复性好。在大规模蛋白生产中,操作简单、蛋白表达量高、细胞毒性低、细胞通用性好。
产品/组分信息
产品名称 | 货号 | 规格 |
Jurnyarn®Tran-S 悬浮细胞专用转染试剂 | C101401 | 0.1ml |
C101410 | 1.0ml | |
C101450 | 5x1.0ml |
运输
常温
保存
2-8℃保存一年
质粒DNA的转染
以100mL培养瓶为例,请参考表1的转染规模调整,步骤如下
1. 细胞接种: 0.2~0.5×106/mL个细胞,接种于20mL培养基中,在37℃,120rpm,5%CO2 的条件下培养
2. 质粒DNA稀释: 将10µg质粒DNA加入Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为50µL;
3. 转染试剂稀释: 取20μL的Jurnyarn®Tran-S加入到30μL的Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为50µL;
4. 复合物制备:将上述质粒DNA稀释液和转染试剂稀释液混合,轻轻吹打均匀后,室温静置10分钟;
5. 将上述100µL复合物加入到细胞培养瓶中,继续摇动培养培养18~48小时后检测转染效率,无需更换培养基。
质粒DNA的转染优化
可通过改变细胞密度、DNA浓度以及Jurnyarn®Tran-S浓度对转染进行优化。Jurnyarn®Tran-S (µL): DNA (µg)可以在1:1和5:1之间调整。转染大于48h后,可通过适量添加培养基的方式延长转染时间。
表1. 不同培养瓶所需转染试剂和DNA的用量
培养瓶 | 细胞数量 | 接种培养基 | Opti-MEM稀释后终体积 | DNA转染 | |
试剂用量 | DNA | ||||
50mL | 0.5×106/mL | 10mL | 50µL | 10µL | 5µg |
100mL | 0.5×106/mL | 20mL | 100µL | 20µL | 10µg |
250mL | 0.5×106/mL | 50mL | 200µL | 50µL | 25µg |
500mL | 0.5×106/mL | 100mL | 400µL | 100µL | 50µg |
1L | 0.5×106/mL | 200mL | 2mL | 200µL | 100µg |
5L | 0.5×106/mL | 1L | 4mL | 1mL | 500µg |