产品概述
Jurnyarn®Transfection Reagent plus是一款高性能、高品质的通用型基因转染试剂，既可用于传送质粒DNA，又具有较强的RNA转染能力。与其它转染试剂相比，具有不受血清影响、毒性低、稳定性好、转染简单易行、重复性好等优点。
应用范围
Jurnyarn®Transfection Reagent plus 通用型基因转染试剂可适用于众多较难转染细胞株的质粒DNA/siRNA的转染。适用于多种贴壁细胞，特别适用于各种较难转细胞如L929、NIH3T3、MCF-7和A549等，均可得到较高的转染效率，且重复性好。
产品/组分信息
产品名称 | 货号 | 规格 |
Jurnyarn®Transfection Reagent plus 通用型基因转染试剂 | C101301 | 0.1 mL |
C101310 | 1.0 mL | |
C101350 | 5x1.0 mL |
运输
常温
保存
2-8℃保存一年
质粒DNA的转染
以24孔板为例，请参考表1的转染规模调整，步骤如下
1. 细胞接种: 每孔接种0.5~1.0×105个细胞，细胞培养12~24小时，使转染时细胞密度达到60~70%融合度；
2. DNA/siRNA稀释: 将0.5µg质粒DNA（或15pmol siRNA）加入Opti-MEM培养基中，稀释后的终体积为10µL；
3. 转染试剂稀释: 取1μL的Jurnyarn®Transfection Reagent plus加 入到9μL的Opti-MEM培养基中，稀释后的终体积为10µL；
4. 复合物制备：将上述质粒DNA（或siRNA）稀释液和转染试剂稀释液混合，轻轻吹打均匀后，室温静置10分钟；
5. 将上述20µL复合物加入到24孔板中，轻轻吹打混匀，继续培养18~48小时后检测转染效率，无需更换培养基。
siRNA的转染
转染步骤与DNA相同，请参考表1的转染规模进行调整，所有数量和体积均是按孔计算。转染高密度细胞可获得高转染效率、高表达水平和低细胞毒性。
质粒DNA和siRNA的转染优化
可通过改变细胞密度、DNA/siRNA浓度以及Jurnyarn®Transfection Reagent plus浓度对转染进行优化。保证细胞融合度在60%以上，Jurnyarn®Transfection Reagent plus(µL): DNA (µg)可以在1:1和5:1之间调整；Jurnyarn®Transfection Reagent plus(µL):siRNA(pmol)可以在0.02:1和0.15:1之间调整。
表1. 不同培养板所需转染试剂和DNA/siRNA的用量
培养板 | 单孔面积 | 接种培养基 | Opti-MEM稀释后终体积 | DNA转染 | siRNA转染 | ||
试剂用量 | DNA | 试剂用量 | siRNA | ||||
96孔板 | 0.3cm2 | 200µL | 10µL | 0.4µL | 0.2µg | 0.5µL | 7.5pmol |
24孔板 | 2.0cm2 | 500µL | 20µL | 1.0µL | 0.5µg | 1.0µL | 15pmol |
12孔板 | 4.0cm2 | 1mL | 40µL | 2.0µL | 1.0µg | 2.0µL | 30pmol |
6孔板 | 10.0cm2 | 2mL | 100µL | 4.0µL | 2.0µg | 4.0µL | 60pmol |
60mm | 20.0cm2 | 5mL | 0.2mL | 8.0µL | 4.0µg | 8.0µL | 120pmol |
10cm | 60.0cm2 | 15mL | 0.6mL | 24µL | 12.0µg | 24µL | 360pmol |